సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌ని ఉపయోగించడం కోసం మేము గత వారం అనేక పరిగణనలను పంచుకున్నాము మరియు మీ సూచన కోసం మేము ఈ అంశాన్ని ఈరోజు ఇక్కడ పూర్తి చేస్తాము.
యొక్క ఎంపిక బఫర్ ఏకాగ్రత
సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో ఉపయోగించే బఫర్ ఏకాగ్రత సాధారణంగా పేపర్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో ఉపయోగించే దానికంటే తక్కువగా ఉంటుంది. సాధారణంగా ఉపయోగించే pH 8.6Bమధ్యవర్తిత్వ బఫర్ సాధారణంగా 0.05 mol/L నుండి 0.09 mol/L పరిధిలో ఎంపిక చేయబడుతుంది. ఏకాగ్రతను ఎన్నుకునేటప్పుడు, ప్రాథమిక నిర్ణయం తీసుకోబడుతుంది. ఉదాహరణకు, ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ చాంబర్‌లోని ఎలక్ట్రోడ్‌ల మధ్య మెమ్బ్రేన్ స్ట్రిప్ యొక్క పొడవు 8-10cm అయితే, పొర పొడవు యొక్క సెంటీమీటర్‌కు 25V వోల్టేజ్ అవసరం, మరియు ప్రస్తుత తీవ్రత పొర వెడల్పు సెంటీమీటర్‌కు 0.4-0.5 mA ఉండాలి. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సమయంలో ఈ విలువలు సాధించబడకపోతే లేదా మించకపోతే, బఫర్ ఏకాగ్రతను పెంచాలి లేదా పలుచన చేయాలి.
మితిమీరిన తక్కువ బఫర్ ఏకాగ్రత బ్యాండ్‌ల వేగవంతమైన కదలికకు మరియు బ్యాండ్ వెడల్పులో పెరుగుదలకు దారి తీస్తుంది. మరోవైపు, అధిక బఫర్ ఏకాగ్రత బ్యాండ్ మైగ్రేషన్‌ను నెమ్మదిస్తుంది, నిర్దిష్ట విభజన బ్యాండ్‌లను వేరు చేయడం కష్టతరం చేస్తుంది.
సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో, కరెంట్‌లో గణనీయమైన భాగం నమూనా ద్వారా నిర్వహించబడుతుందని గమనించాలి, ఇది గణనీయమైన మొత్తంలో వేడిని ఉత్పత్తి చేస్తుంది. కొన్నిసార్లు, ఎంచుకున్న బఫర్ ఏకాగ్రత సముచితంగా పరిగణించబడుతుంది. అయినప్పటికీ, పెరిగిన పర్యావరణ ఉష్ణోగ్రత పరిస్థితులలో లేదా అధిక వోల్టేజీని ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు, వేడి కారణంగా నీటి బాష్పీభవనం తీవ్రమవుతుంది, దీని ఫలితంగా అధిక బఫర్ ఏకాగ్రత ఏర్పడుతుంది మరియు పొర ఎండిపోయేలా చేస్తుంది.
నమూనా వాల్యూమ్
సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో, ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ పరిస్థితులు, నమూనా యొక్క లక్షణాలు, మరక పద్ధతులు మరియు గుర్తించే పద్ధతులు వంటి వివిధ కారకాల ద్వారా నమూనా వాల్యూమ్ మొత్తం నిర్ణయించబడుతుంది. సాధారణ సూత్రం ప్రకారం, గుర్తించే పద్ధతి మరింత సున్నితమైనది, నమూనా వాల్యూమ్ చిన్నదిగా ఉంటుంది, ఇది వేరు చేయడానికి ప్రయోజనకరంగా ఉంటుంది. నమూనా వాల్యూమ్ అధికంగా ఉన్నట్లయితే, ఎలెక్ట్రోఫోరేటిక్ విభజన నమూనాలు స్పష్టంగా ఉండకపోవచ్చు మరియు మరక కూడా సమయం తీసుకుంటుంది. ఏదేమైనప్పటికీ, ఎల్యూషన్ కలర్మెట్రిక్ డిటెక్షన్ పద్ధతులను ఉపయోగించి వేరు చేయబడిన స్టెయిన్డ్ బ్యాండ్‌లను పరిమాణాత్మకంగా విశ్లేషించేటప్పుడు, నమూనా వాల్యూమ్ చాలా తక్కువగా ఉండకూడదు, ఎందుకంటే ఇది కొన్ని భాగాలకు తక్కువ శోషణ విలువలను కలిగిస్తుంది, వాటి కంటెంట్‌ను లెక్కించడంలో అధిక లోపాలకు దారి తీస్తుంది. అటువంటి సందర్భాలలో, నమూనా వాల్యూమ్ తగిన విధంగా పెంచబడాలి.
సాధారణంగా, నమూనా అప్లికేషన్ లైన్‌లోని ప్రతి సెంటీమీటర్‌లో జోడించబడిన నమూనా వాల్యూమ్ 0.1 నుండి 5 μL వరకు ఉంటుంది, ఇది 5 నుండి 1000 μg నమూనా మొత్తానికి సమానం. ఉదాహరణకు, సాధారణ సీరం ప్రోటీన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ విశ్లేషణలో, అప్లికేషన్ లైన్ యొక్క ప్రతి సెంటీమీటర్‌పై జోడించిన నమూనా వాల్యూమ్ సాధారణంగా 60 నుండి 80 μg ప్రోటీన్‌కి సమానమైన 1 μLని మించదు. అయినప్పటికీ, అదే ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ పద్ధతిని ఉపయోగించి లిపోప్రొటీన్లు లేదా గ్లైకోప్రొటీన్‌లను విశ్లేషించేటప్పుడు, నమూనా వాల్యూమ్‌ను తదనుగుణంగా పెంచడం అవసరం.
ముగింపులో, ప్రాథమిక ప్రయోగాల శ్రేణి ద్వారా నిర్దిష్ట పరిస్థితుల ఆధారంగా అత్యంత అనుకూలమైన నమూనా వాల్యూమ్‌ను ఎంచుకోవాలి.
స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఎంపిక
సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లోని వేరు చేయబడిన బ్యాండ్‌లు సాధారణంగా గుర్తించే ముందు తడిసినవి. వేర్వేరు నమూనా భాగాలకు వేర్వేరు స్టెయినింగ్ పద్ధతులు అవసరమవుతాయి మరియు సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌కు తగిన స్టెయినింగ్ పద్ధతులు ఫిల్టర్ పేపర్‌కు పూర్తిగా వర్తించకపోవచ్చు.
స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్‌ను ఎంచుకోవడానికి మూడు ప్రధాన సూత్రాలు ఉన్నాయిసెల్యులోజ్ అసిటేట్ పొర. ముందుగా,ఆల్కహాల్-కరిగే రంగుల కంటే నీటిలో కరిగే రంగులకు ప్రాధాన్యత ఇవ్వాలి, తరువాతి మరక ద్రావణం వల్ల ఏర్పడే పొర సంకోచం మరియు వైకల్యాన్ని నివారించడానికి. మరక తర్వాత, పొరను నీటితో కడగడం మరియు మరక వ్యవధిని తగ్గించడం చాలా ముఖ్యం. లేకపోతే, పొర వంకరగా లేదా కుంచించుకుపోవచ్చు, ఇది తదుపరి గుర్తింపును ప్రభావితం చేస్తుంది.
రెండవది, నమూనా కోసం బలమైన స్టెయినింగ్ అనుబంధంతో రంగులను ఎంచుకోవడం ఉత్తమం. సీరం ప్రోటీన్‌ల సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో, అమైనో బ్లాక్ 10B సాధారణంగా ఉపయోగించబడుతుంది ఎందుకంటే వివిధ సీరం ప్రోటీన్ భాగాలు మరియు దాని స్థిరత్వం కోసం దాని బలమైన స్టెయినింగ్ అనుబంధం.
మూడవదిగా, నమ్మదగిన నాణ్యమైన రంగులను ఎంచుకోవాలి. కొన్ని రంగులు, ఒకే పేరును కలిగి ఉన్నప్పటికీ, మరక తర్వాత ముఖ్యంగా ముదురు నేపథ్యానికి దారితీసే మలినాలను కలిగి ఉండవచ్చు. ఇది వాస్తవానికి బాగా వేరు చేయబడిన బ్యాండ్‌లను కూడా అస్పష్టం చేస్తుంది, వాటిని వేరు చేయడం కష్టతరం చేస్తుంది.
చివరగా, స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఏకాగ్రత ఎంపిక ముఖ్యం. సిద్ధాంతపరంగా, అధిక స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఏకాగ్రత నమూనా భాగాల యొక్క మరింత క్షుణ్ణంగా మరక మరియు మెరుగైన మరక ఫలితాలకు దారితీస్తుందని అనిపించవచ్చు. అయితే, ఇది అలా కాదు. నమూనా భాగాలు మరియు రంగుల మధ్య బైండింగ్ అనుబంధం ఒక నిర్దిష్ట పరిమితిని కలిగి ఉంటుంది, ఇది స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఏకాగ్రత పెరుగుదలతో పెరగదు. దీనికి విరుద్ధంగా, అధిక స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఏకాగ్రత రంగును వృధా చేయడమే కాకుండా స్పష్టమైన నేపథ్యాన్ని సాధించడం కష్టతరం చేస్తుంది. అంతేకాకుండా, రంగు తీవ్రత నిర్దిష్ట గరిష్ట విలువను చేరుకున్నప్పుడు, రంగు యొక్క శోషణ వక్రరేఖ సరళ సంబంధాన్ని అనుసరించదు, ప్రత్యేకించి పరిమాణాత్మక కొలతలలో. సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెమ్బ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో, స్టెయినింగ్ సొల్యూషన్ ఏకాగ్రత సాధారణంగా పేపర్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌లో ఉపయోగించే దానికంటే తక్కువగా ఉంటుంది.
బీజింగ్ లియుయి బయోటెక్నాలజీ గురించి తెలుసుకోవలసిన వివరాలు's సెల్యులోజ్ అసిటేట్ పొరఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ట్యాంక్ మరియు దాని ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ అప్లికేషన్, దయచేసి ఇక్కడ సందర్శించండి:
ఎల్సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెంబ్రేన్ ద్వారా సీరం ప్రోటీన్‌ను వేరు చేయడానికి ప్రయోగం
ఎల్సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెంబ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్
ఎల్సెల్యులోజ్ అసిటేట్ మెంబ్రేన్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (1) ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు అనేక పరిగణనలు గుర్తుంచుకోవాలి
మీరు మా ఉత్పత్తుల కోసం ఏదైనా కొనుగోలు ప్రణాళికను కలిగి ఉంటే, దయచేసి మమ్మల్ని సంప్రదించడానికి సంకోచించకండి. మీరు ఇమెయిల్‌లో మాకు సందేశాన్ని పంపవచ్చు[ఇమెయిల్ రక్షించబడింది]లేదా[ఇమెయిల్ రక్షించబడింది], లేదా దయచేసి మాకు +86 15810650221కి కాల్ చేయండి లేదా Whatsapp +86 15810650221 లేదా Wechat: 15810650221ని జోడించండి.
సూచన:మిస్టర్ లి ద్వారా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్(రెండవ ఎడిషన్)
పోస్ట్ సమయం: జూన్-06-2023