DNA ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సాధారణ సమస్యలు

DNA విశ్లేషణ కోసం పరమాణు జీవశాస్త్రంలో ఉపయోగించే ప్రధాన పద్ధతుల్లో జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ఒకటి. ఈ పద్ధతిలో DNA శకలాలు ఒక జెల్ ద్వారా తరలించబడతాయి, ఇక్కడ అవి పరిమాణం లేదా ఆకారం ఆధారంగా వేరు చేయబడతాయి. అయితే, మీరు ఎప్పుడైనా మీ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ప్రయోగాల సమయంలో అగరోజ్ జెల్‌పై స్మెర్డ్ బ్యాండ్‌లు లేదా జెల్‌పై బ్యాండ్‌లు లేకుండా ఏవైనా లోపాలు ఎదుర్కొన్నారా? ఈ లోపాలకు కారణం ఏమిటి?

మా సాంకేతిక నిపుణులు మీ సూచన కోసం ఇక్కడ ట్రబుల్షూటింగ్ యొక్క జంటలను సంగ్రహించారు.

1. అగరోజ్ జెల్ మీద స్మెర్డ్ బ్యాండ్లు

●DNA క్షీణించింది. న్యూక్లీజ్ కాలుష్యాన్ని నివారించండి.

● ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్ తాజాగా లేదు. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ను పదేపదే ఉపయోగించిన తర్వాత, అయానిక్ బలం తగ్గుతుంది మరియు దాని pH విలువ పెరుగుతుంది, కాబట్టి బఫర్ సామర్థ్యం బలహీనపడుతుంది, ఇది ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ప్రభావాన్ని ప్రభావితం చేస్తుంది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ను తరచుగా భర్తీ చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

● సరికాని ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ పరిస్థితులు ఉపయోగించబడ్డాయి. వోల్టేజీని 20 V/cm కంటే మించకుండా అనుమతించవద్దు మరియు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సమయంలో ఉష్ణోగ్రత <30° Cని నిర్వహించండి. జెయింట్ DNA స్ట్రాండ్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం, ఉష్ణోగ్రత <15° C ఉండాలి. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్ తగినంత బఫర్ సామర్థ్యాన్ని కలిగి ఉందో లేదో తనిఖీ చేయండి.

● జెల్‌పై చాలా ఎక్కువ DNA లోడ్ చేయబడింది. DNA మొత్తాన్ని తగ్గించండి.

● DNAలో చాలా ఉప్పు. అధునాతనమైన అదనపు లవణాలను తొలగించడానికి ఇథనాల్ అవక్షేపణను ఉపయోగించండి.

● DNA ప్రోటీన్‌తో కలుషితమైంది. అధునాతనంగా ప్రోటీన్‌ను తొలగించడానికి ఫినాల్ వెలికితీతలను ఉపయోగించండి.

● DNA డీనాట్ చేయబడింది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ముందు వేడి చేయవద్దు. 20 mM NaClతో బఫర్‌లో DNA పలుచన చేయండి.

2. క్రమరాహిత్యాలు DNA బ్యాండ్ వలస

● λహింద్ III ఫ్రాగ్మెంట్ యొక్క COS సైట్ యొక్క పునరుద్ధరణ. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌కు ముందు DNAను 65° C కంటే తక్కువ 5 నిమిషాలు వేడి చేసి, ఆపై 5 నిమిషాల పాటు మంచు యూనిట్‌పై చల్లబరచండి.

● సరికాని ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ పరిస్థితులు ఉపయోగించబడ్డాయి. వోల్టేజీని 20 V/cm కంటే మించకుండా అనుమతించవద్దు మరియు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సమయంలో ఉష్ణోగ్రత <30° Cని నిర్వహించండి. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌కు తగినంత బఫర్ సామర్థ్యం ఉందో లేదో తనిఖీ చేయండి.

● DNA డీనాట్ చేయబడింది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ముందు వేడి చేయవద్దు. 20 mM NaClతో బఫర్‌లో DNA పలుచన చేయండి.

3. అగరోజ్ జెల్‌పై మందమైన లేదా DNA బ్యాండ్‌లు లేవు

● జెల్‌పై లోడ్ చేయబడిన DNA యొక్క తగినంత పరిమాణం లేదా గాఢత లేదు. DNA మొత్తాన్ని పెంచండి. పాలీయాక్రిలమైడ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ అగరోస్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కంటే కొంచెం ఎక్కువ సున్నితంగా ఉంటుంది మరియు నమూనా లోడింగ్‌ను తగిన విధంగా తగ్గించవచ్చు.

● DNA అధోకరణం చెందింది. న్యూక్లీజ్ కాలుష్యాన్ని నివారించండి.

● DNA జెల్ నుండి ఎలెక్ట్రోఫోరేస్ చేయబడింది. తక్కువ సమయం కోసం జెల్‌ను ఎలెక్ట్రోఫోరేస్ చేయండి, తక్కువ వోల్టేజీని ఉపయోగించండి లేదా ఎక్కువ శాతం జెల్‌ను ఉపయోగించండి.

● ఇథిడియం బ్రోమైడ్-స్టెయిన్డ్ DNA యొక్క విజువలైజేషన్ కోసం సరికాని W కాంతి మూలం ఉపయోగించబడింది. ఎక్కువ సున్నితత్వం కోసం షార్ట్‌వేవ్‌లెంగ్త్ (254 nm) W కాంతిని ఉపయోగించండి.

4. DNA బ్యాండ్‌లు లేవు

●చిన్న పరిమాణ DNA జెల్ నుండి ఎలెక్ట్రోఫోరేస్ చేయబడింది. తక్కువ సమయం కోసం జెల్‌ను ఎలెక్ట్రోఫోరేస్ చేయండి, తక్కువ వోల్టేజీని ఉపయోగించండి లేదా ఎక్కువ శాతం జెల్‌ను ఉపయోగించండి.

● సారూప్య పరమాణువుల DNA బ్యాండ్‌లను వేరు చేయడం కష్టం. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సమయాన్ని పెంచండి మరియు ఏకాగ్రతను తనిఖీ చేయండిజెల్ యొక్క సరైన శాతం జెల్ ఉపయోగించబడుతుందని నిర్ధారించుకోవడానికి.

● DNA డీనాట్ చేయబడింది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ముందు వేడి చేయవద్దు. 20 mM NaClతో బఫర్‌లో DNA పలుచన చేయండి.

● DNA తంతువులు భారీగా ఉంటాయి మరియు సంప్రదాయ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ తగినది కాదు. పల్స్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌పై విశ్లేషించండి.అగరోజ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌తో మీకు ఏ ఇతర సమస్యలు ఉన్నాయి? మేము భవిష్యత్తులో గైడ్‌ల కోసం మరింత పరిశోధన చేస్తాము.

బీజింగ్ లియుయి బయోటెక్నాలజీ కో., లిమిటెడ్ (లియుయి బయోటెక్) అనేది చైనాలో ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సంబంధిత ఉత్పత్తులపై దృష్టి సారించే ఒక ప్రత్యేక సంస్థ. దీని కథ 1970లో మొదలవుతుంది, చైనా ఇంకా సంస్కరణ మరియు ప్రారంభ సమయానికి ప్రవేశించలేదు. సంవత్సరాల అభివృద్ధి ద్వారా, Liuyi Bitotech దాని స్వంత బ్రాండ్‌ను కలిగి ఉంది, ఇది ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ఉత్పత్తుల కోసం దేశీయ మార్కెట్‌లో Liuyi బ్రాండ్‌గా పిలువబడుతుంది.

Liuyi బ్రాండ్ చైనాలో 50 సంవత్సరాల కంటే ఎక్కువ చరిత్రను కలిగి ఉంది మరియు కంపెనీ ప్రపంచవ్యాప్తంగా స్థిరమైన మరియు అధిక-నాణ్యత ఉత్పత్తులను అందించగలదు. సంవత్సరాల అభివృద్ధి ద్వారా, ఇది మీ ఎంపికకు అర్హమైనది!

లియుయి బయోటెక్ యొక్క క్షితిజసమాంతర ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కణాలు (ట్యాంకులు/ఛాంబర్లు) మంచి ప్రదర్శనతో అధిక నాణ్యత కలిగి ఉంటాయి. వివిధ పరిమాణాల జెల్ ట్రేలతో, అవి మీ విభిన్న ప్రయోగాత్మక అవసరాలను తీర్చగలవు. మాకు మా స్వంత సాంకేతిక బృందం మరియు ఫ్యాక్టరీ ఉంది. డిజైన్ నుండి తయారీ వరకు, ముడి పదార్థాలు కీలక భాగాల వరకు, మేము మొత్తం ప్రక్రియను నియంత్రించగలము. DYCP 31 సిరీస్ DNA ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం రూపొందించబడింది, ఇవి మోడల్DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, మరియుDYCP-31E. వాటిలో తేడాలు జెల్ పరిమాణాలు మరియు ధర. మేము మా వినియోగదారుల కోసం పూర్తి పరిమాణ ఉత్పత్తులను అందిస్తాము. మోడల్DYCP-32Cఅతిపెద్ద జెల్ 250mm*250mmని తయారు చేయవచ్చు.

ఇంతలో, మేము మా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ విద్యుత్ సరఫరాను సిఫార్సు చేస్తున్నాముDYY-6C,DYY-6DమరియుDYY-10Cమా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కణాలు (ట్యాంకులు/ఛాంబర్‌లు) DYCP-31 మరియు 32 సిరీస్‌ల కోసం.

మీకు ఉత్పత్తుల గురించి మరింత సమాచారం కావాలంటే, దయచేసి మరింత పొందడానికి ఈ వెబ్‌సైట్‌ను సందర్శించండి మరియు మీకు ఏమి కావాలో మాకు తెలియజేయడానికి ఇమెయిల్ ద్వారా మమ్మల్ని సంప్రదించడానికి స్వాగతం మరియు మేము మీ కోసం పరిష్కారాలను అందించగలమో లేదో చూడండి.

మా గురించి మరింత సమాచారం కోసం, దయచేసి ఇమెయిల్ ద్వారా మమ్మల్ని సంప్రదించండి[ఇమెయిల్ రక్షించబడింది], [ఇమెయిల్ రక్షించబడింది].