అగరోస్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ యొక్క ప్రాథమిక పద్ధతులు(1)

1. వర్గీకరణ

జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ నిలువు రకాలు (కాలమ్ జెల్లు మరియు స్లాబ్ జెల్‌లతో సహా) మరియు క్షితిజ సమాంతర రకాలు (ప్రధానంగా స్లాబ్ జెల్లు) (మూర్తి 6-18)గా విభజించబడింది. సాధారణంగా, నిలువుగా వేరుచేయడం క్షితిజ సమాంతరానికి కొంచెం ఎక్కువ, కానీ క్షితిజ సమాంతర జెల్ తయారీకి కనీసం నాలుగు ప్రయోజనాలు ఉన్నాయి: మొత్తం జెల్ క్రింద మద్దతు ఉంది, ఇది తక్కువ సాంద్రత కలిగిన అగరోస్‌ను ఉపయోగించడానికి అనుమతిస్తుంది; వివిధ స్పెసిఫికేషన్ల అగరోజ్ జెల్ ప్లేట్లను సిద్ధం చేయడం సాధ్యపడుతుంది; జెల్ తయారీ మరియు నమూనా లోడింగ్ మరింత సౌకర్యవంతంగా ఉంటాయి; ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ చాంబర్ నిర్మించడం సులభం మరియు ఖర్చుతో కూడుకున్నది. ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్ యొక్క ఉపరితలం నుండి 1 మిమీ దిగువన పూర్తిగా మునిగిపోయిన అగరోస్ జెల్ ప్లేట్‌తో క్షితిజసమాంతర ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ నిర్వహిస్తారు కాబట్టి, దీనిని సబ్‌మెర్జ్డ్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ అని కూడా అంటారు.

图片2

అగరోజ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ కోసం ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ట్యాంక్ DYCP-31DN

2.బఫర్ సిస్టమ్

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ విభజనలో, చాలా వ్యవస్థలు నిరంతర వ్యవస్థలను అవలంబిస్తాయి. సాధారణంగా ఉపయోగించే ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌లలో TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L బోరిక్ యాసిడ్, 0.0024mol/L EDTA) బఫర్ మరియు THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L/L/L సోడియం అసిటేట్, 0.0018mol/L EDTA) బఫర్. ఈ బఫర్‌లు సాధారణంగా 10x స్టాక్ సొల్యూషన్స్‌గా తయారు చేయబడతాయి మరియు ఉపయోగంలో ఉన్నప్పుడు అవసరమైన ఏకాగ్రతకు కరిగించబడతాయి. అగరోజ్ జెల్‌లోని లీనియర్ మరియు వృత్తాకార DNA యొక్క మైగ్రేషన్ రేట్లు ఉపయోగించిన బఫర్‌తో మారుతూ ఉంటాయి. THE బఫర్‌లో, లీనియర్ DNA యొక్క మైగ్రేషన్ రేటు వృత్తాకార DNA కంటే ఎక్కువగా ఉంటుంది, TBE బఫర్‌లో దీనికి విరుద్ధంగా ఉంటుంది.

3

3.అగరోస్ జెల్ తయారీ

(1) క్షితిజసమాంతర అగరోస్ జెల్ తయారీ

(ఎ) 1x ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ని ఉపయోగించి అగరోజ్ జెల్ యొక్క అవసరమైన సాంద్రతను సిద్ధం చేయండి.

(బి) మరుగుతున్న నీటి స్నానంలో, మాగ్నెటిక్ స్టిరర్‌లో లేదా మైక్రోవేవ్‌లో పూర్తిగా కరిగిపోయేలా అగరోజ్‌ను వేడి చేయండి. అగరోజ్ ద్రావణాన్ని 55°Cకి చల్లబరచండి మరియు ఎథిడియం బ్రోమైడ్ (EB) రంగును 0.5 μg/ml తుది సాంద్రతకు జోడించండి.

(సి) గ్లాస్ లేదా యాక్రిలిక్ ప్లేట్‌ల అంచులను కొద్ది మొత్తంలో అగరోజ్ జెల్‌తో మూసివేసి, దువ్వెనను జోడించి, దువ్వెన పళ్లను ప్లేట్‌కు దాదాపు 0.5~1.0 మిమీ ఎత్తులో ఉంచండి.

(డి) కరిగిన అగరోజ్ జెల్ ద్రావణాన్ని నిరంతరం గాజు లేదా యాక్రిలిక్ ప్లేట్ అచ్చులో పోయండి (మందం DNA నమూనా పరిమాణంపై ఆధారపడి ఉంటుంది), గాలి బుడగలు పరిచయం కాకుండా ఉంటుంది. గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద సహజంగా పటిష్టం చేయనివ్వండి.

(ఇ) పూర్తిగా గట్టిపడిన తర్వాత దువ్వెనను జాగ్రత్తగా తొలగించండి. జెల్ ట్యాంక్‌కు తగిన మొత్తంలో ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ను జోడించండి, జెల్ ప్లేట్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్ యొక్క ఉపరితలం కంటే 1 మిమీ దిగువన మునిగి ఉండేలా చూసుకోండి.

(2) వర్టికల్ అగరోస్ జెల్ తయారీ

(ఎ) ఇథనాల్‌తో కడగడం ద్వారా గాజు పలకల నుండి గ్రీజు లేదా అవశేషాలను తొలగించండి.

(బి) ముందు మరియు వెనుక డ్యామ్‌ల మధ్య స్పేసర్ ప్లేట్‌లను ఉంచండి, స్పేసర్ ప్లేట్ల అంచులను ముందు మరియు వెనుక డ్యామ్‌లతో సమలేఖనం చేయండి మరియు వాటిని బిగింపులతో భద్రపరచండి.

(సి) జెల్ కాస్టింగ్ చాంబర్ దిగువన 1 సెం.మీ ఎత్తులో ఉన్న అగరోజ్ ప్లగ్‌ను రూపొందించడానికి స్పేసర్ ప్లేట్‌ల అంచుల మధ్య 1x బఫర్‌లో 2% అగరోజ్‌ని జోడించండి.

(d) 1x బఫర్‌లో తయారుచేసిన కావలసిన ఏకాగ్రత వద్ద కరిగిన అగరోజ్ జెల్‌ను పైభాగంలో 1 సెం.మీ వరకు దిగువన ఉన్న జెల్ చాంబర్‌లో పోయాలి.

(ఇ) దువ్వెన పళ్ల కింద గాలి బుడగలు చిక్కుకోకుండా దువ్వెనను చొప్పించండి. కొన్నిసార్లు, అగరోజ్ జెల్ శీతలీకరణ సమయంలో దువ్వెన దంతాల వద్ద ముడతలు కనిపించవచ్చు; అటువంటి సందర్భాలలో, దానిని పటిష్టం చేయడానికి పైభాగంలో కొంచెం కరిగిన అగరోజ్ జోడించండి.

(ఎఫ్) దువ్వెన తొలగించండి. లోడింగ్ స్లాట్‌లో బఫర్ లీకేజీని నిరోధించడానికి, అగరోజ్ జెల్ ప్లేట్ మరియు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ చాంబర్ మధ్య కనెక్షన్‌ను 2% అగరోజ్‌తో సీల్ చేయండి మరియు అవసరమైన మొత్తంలో బఫర్‌ను జోడించండి.

(g) జెల్ చాంబర్‌కి 1x ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ బఫర్‌ని జోడించండి.

(h) బఫర్‌కింద ఉన్న అగరోజ్ జెల్‌పై DNA నమూనాలను జాగ్రత్తగా లోడ్ చేయండి.

3

అగరోజ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ గురించి ప్రాథమిక జ్ఞానం గురించి మరింత సమాచారం, మేము వచ్చే వారం పంచుకుంటాము. ఈ సమాచారం మీ ప్రయోగానికి సహాయకారిగా ఉండాలని కోరుకుంటున్నాను.

బీజింగ్ లియుయి బయోటెక్నాలజీ కో. లిమిటెడ్ (లియుయి బయోటెక్నాలజీ) మా స్వంత ప్రొఫెషనల్ టెక్నికల్ టీమ్ మరియు R&D సెంటర్‌తో 50 సంవత్సరాలకు పైగా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సాధనాల తయారీలో ప్రత్యేకతను కలిగి ఉంది. మేము డిజైన్ నుండి తనిఖీ వరకు నమ్మకమైన మరియు పూర్తి ఉత్పత్తి శ్రేణిని కలిగి ఉన్నాము మరియు గిడ్డంగి, అలాగే మార్కెటింగ్ మద్దతు. మా ప్రధాన ఉత్పత్తులు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సెల్ (ట్యాంక్/ఛాంబర్), ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ పవర్ సప్లై, బ్లూ LED ట్రాన్సిల్యూమినేటర్, UV ట్రాన్సిల్యూమినేటర్, జెల్ ఇమేజ్ & అనాలిసిస్ సిస్టమ్ మొదలైనవి.

మేము ఇప్పుడు భాగస్వాముల కోసం వెతుకుతున్నాము, OEM ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ట్యాంక్ మరియు పంపిణీదారులు ఇద్దరూ స్వాగతించబడ్డారు.

మీరు మా ఉత్పత్తుల కోసం ఏదైనా కొనుగోలు ప్రణాళికను కలిగి ఉంటే, దయచేసి మమ్మల్ని సంప్రదించడానికి సంకోచించకండి. మీరు ఇమెయిల్‌లో మాకు సందేశాన్ని పంపవచ్చు[ఇమెయిల్ రక్షించబడింది]లేదా[ఇమెయిల్ రక్షించబడింది], లేదా దయచేసి మాకు +86 15810650221కి కాల్ చేయండి లేదా Whatsapp +86 15810650221 లేదా Wechat: 15810650221ని జోడించండి.

దయచేసి Whatsapp లేదా WeChatలో జోడించడానికి QR కోడ్‌ని స్కాన్ చేయండి.

2


పోస్ట్ సమయం: డిసెంబర్-07-2023